肉制品中糖檢測前處理方法-糖專用SPE柱凈化

本篇中的肉制品，如素肉堡、腌漬鮮嫩雞胸肉、原味炸雞、辣味炸雞、基礎風味雞肉絲、香料雞排、雞翅蓉、雞肉熱狗、香草雞腿排等，在加工過程中添加復雜的佐料進行調味，這給肉制品中糖的定量分析造成很大困難。

肉制品中糖的定量分析有兩個難點：

一、沒有現成的定量分析標準方法可以參考。

二、凈化不che底的樣品溶液上機LC/ELSD后，極易毀壞糖專用色譜柱和堵塞ELSD霧化器，消耗很大的維修成本；

為了解決這個問題，巨研科技研發出FaAEx-AD2糖專用SPE凈化柱，摸索出合適的前處理操作步驟和儀器分析條件。

此分析方法通過方法驗證后，邀請業內同行進行實踐驗證，同行反饋FaAEx-AD2糖專用SPE柱的凈化效果良好！

本篇將介紹兩個肉制品中糖檢測的方法：

方法一：使用巨研FaAEx-AD2 糖專用SPE柱凈化，以LC/ELSD法分析；

方法二：參考GB/T 9695.31-2008方法，使用分光光度法和直接滴定法分析。

方法一：使用巨研FaAEx-AD2 糖專用SPE柱凈化

以泰式調味腿肉片樣品為例，測試果糖（Fructose）、shan梨醇（Sorbitol）、半乳糖（Galactose）、葡萄糖（Glucose）、蔗糖（Sucrose）、乳糖（Lactose）和麥芽糖（Maltose），樣品加入10ml的50%乙醇溶液、超聲、震蕩、定容、離心后取上清液。

將上清液通過FaAEx-AD2糖專用柱除雜（只需一步過柱），獲得目標物溶液，過濾后上機到LC/ELSD進行定量分析。

（1）前處理步驟：

樣品均質

↓

取1g樣品于離心管中，加10 ml 50%乙醇溶液

↓

超聲震蕩20min

↓

高速震蕩10min

↓

以50%乙醇溶液定容至20 mL(固體樣品:直接加10mL)

↓

6000rpm離心30min

↓

取10ml上清液過巨研FaAEx-AD2 糖專用SPE柱，取濾液上機分析

（無須活化平衡，一步通過法獲得目標物）

（2）LC-MSMS分析出譜圖如下：

（3）小結：

使用FaAEx-AD2 糖專用SPE柱凈化后，再上機分析，有兩個好處：

1、果糖（Fructose）、shan梨醇（Sorbitol）、半乳糖（Galactose）、葡萄糖（Glucose）、蔗糖（Sucrose）、乳糖（Lactose）和麥芽糖（Maltose）這7種糖的回收率在80-120%之間。

2、有效延長糖專用色譜柱的使用壽命，避免堵塞ELSD霧化器，大大降低耗材和配件的損耗成本。

3、前處理中已經進行萃取、超聲和離心的凈化操作，為什么還要開發FaAEx-AD2 糖專用柱再次除雜？

答：因為離心得到的上清液過濾膜后上機分析，進幾針樣品后，糖專用色譜柱被污染、ELSD霧化器也很快被堵塞，基本不能進行日常的品控管理。

離心得到的上清液經過FaAEx-AD2 糖專用柱凈化后，有效地解決了這個問題，需要在日常做肉制品中糖測試的用戶，持續回購FaAEx-AD2 糖專用柱。

方法二：參考GB/T 9695.31-2008標準方法

關于肉制品中總糖的檢測，我們有一個標準方法，即：《GB/T 9695.31-2008肉制品 總糖含量測定》，以葡萄糖為對照物。

第一法適用于肉制品中總糖含量的測定，使用分光光度法；

試樣中的總糖含量以葡萄糖計。

第二法適用于不含淀粉的肉制品中總糖含量的測定，使用直接滴定法測糖

總結：

1、肉制品中糖的檢測，若采用GB/T 9695.31-2008標準方法，前處理步驟操作復雜，耗時長，花費大量人力，分析結果的靈敏度比LC/ELSD法低，幾乎不能做定量分析。

2、采用LC/ELSD法分析肉制品中的糖含量，難點在于怎么充分去除復雜樣品中的雜質。通過在樣品中加入10ml的50%乙醇溶液、超聲、震蕩、定容、離心、過濾這些步驟，回收率尚可，但除雜效果不佳，進樣幾次后，糖專用色譜柱被污染，甚至ELSD霧化器被堵塞，增加耗材和儀器配件的消耗成本。

3、將離心后的上清液，一步法通過FaAEx-AD2糖專用SPE柱的凈化、過濾后上機分析，可有效去除雜質，延長糖專用色譜柱和ELSD的使用壽命，且HPLC基線更加平穩，回收率表現更優（80-120%）。